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流式细胞仪的原理特征

发布时间:2021-03-08      点击次数:312
  流式细胞仪原理:
 
  流式细胞仪能“看到”的物体大小是微米级的细胞或颗粒,波长范围多在可见光范围内。
 
  流式细胞仪的原理,简而言之就是一定波的激光束直接照射到 高压驱动的液流,产生的光信号被多个接收器接收,一个是在激光束直 线方向上接收到的前向角散射光信号,其他的是在激光束垂直方向上 接收到的光信号,包括侧向角散射光信号和荧光信号。液流中悬浮的 细胞能够使激光束发生散射,而细胞上结合的荧光素被激光激发后能 够发射波长高于激发光的荧光,散射光信号和荧光信号被相应的接收 器掊收后,根据接收到信号的强弱就能反映出每个细胞的物理和化学 特征。
 
  具体来讲就是,待测样本被制备成单个细胞悬液,将感兴趣的部分经特异性荧光染料染色,置于流式细 胞仪的样品室。经样品管,在气体的压力下进入流动室。流动室内充满鞘液,在鞘液的约束 下。细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,成为细胞液柱。液柱与入射的激光束垂直相交,相交点称为测量区。通过测量区的细胞被激发产生荧光。在与入射光束和液柱垂直的方向放置透镜、反射镜、滤光片等光学元件和检测器,用以收集散射光信号以及荧光信号。被收集的荧光信号经电子电路处理放大后,输人计算机。经计算机处理,得出可以判读到该检测样本 性质、数量的数字信息。
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